發(fā)布時(shí)間： 2022-08-24 點(diǎn)擊次數(shù)： 677次
ATCC細(xì)胞在收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存，避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
科研常用細(xì)胞直接從組織上分離的原代細(xì)胞和購(gòu)買的細(xì)胞系，通常將從組織上分離獲得的一代到十代內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞，而大部分原代細(xì)胞會(huì)在此之后逐漸生長(zhǎng)停滯并衰老死亡，極少量能繼續(xù)存活至五十代以后的細(xì)胞遺傳信息發(fā)生了改變，成為無(wú)限細(xì)胞系或連續(xù)細(xì)胞系，一般的無(wú)限細(xì)胞系只具有永生性的特點(diǎn)，還有一些細(xì)胞的接觸抑制消失，可以多層生長(zhǎng)，甚至在異體接種后還有致瘤性。
無(wú)限細(xì)胞系由于其永生和快速分裂的特點(diǎn)一直是細(xì)胞水平研究時(shí)的熱門選擇，由于方便培養(yǎng)、種類繁多、生長(zhǎng)速度快且成本較低，可以快速開展研究，使得各種無(wú)限細(xì)胞系被廣泛應(yīng)用。然無(wú)限細(xì)胞系“渾身是寶”，但在應(yīng)用上還是有一些限制：
1.細(xì)胞的生物學(xué)特性改變
在研究過程中由于需要大量的樣本，無(wú)限細(xì)胞系需要快速繁殖并擴(kuò)大培養(yǎng)，而其在連續(xù)傳代培養(yǎng)過程中會(huì)發(fā)生一定突變，無(wú)限制地連續(xù)傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞系的基因型和表型都發(fā)生改變，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
2.細(xì)胞系交叉污染
這里說的交叉污染是細(xì)胞系之間的交叉污染，就是做實(shí)驗(yàn)用的細(xì)胞系內(nèi)可能混進(jìn)了其他種類的細(xì)胞。這可能是由于建立細(xì)胞系時(shí)導(dǎo)致的，也有可能是一些不當(dāng)操作如同期多種細(xì)胞共養(yǎng)、耗材重復(fù)使用等，或者是由于一些細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品導(dǎo)致的，可能很不經(jīng)意的一個(gè)操作便導(dǎo)致了整個(gè)實(shí)驗(yàn)的失敗。
3.細(xì)胞應(yīng)用
很多細(xì)胞在體內(nèi)體外培養(yǎng)中無(wú)法增殖，比如在使用神經(jīng)元、骨骼肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、周細(xì)胞以及終末分化的肝細(xì)胞等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，每次都需要再次從新鮮的組織中分離原代細(xì)胞。
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