分析靈敏度作為影響體外診斷試劑性能的重要指標之一,LoB、LoD、LoQ經常會在試劑的研發、注冊過程中出現。很多人對這三個概念有著諸多困惑,分不清三者的區別。今天小編就為大家梳理一下這三個靈敏度的指標的定義和建立方法,希望對大家有所幫助。
01:LoB:Limit of blank
譯為:空白檢出限,是檢測空白樣本的結果。
由于試劑組分、儀器等因素的影響,即使樣本中不含待測物質,結果也有可能不為0,所以需要對這些不存在臨床意義的結果做一個定義,這就是LoB。LoB值以下的濃度可以視為0濃度。比如LoB是5 ng/mL,雖然測試結果為4 ng/mL,但可以理解此樣本中不含有待測物質,或者濃度已經低到全部檢測不出來。
02:LoD:Limit of detection
譯為:很少檢出限,是有一定幾率能夠檢測出來的很少濃度,可以區別有和無,但是無法確定具體濃度。比如LoD是8 ng/mL,檢測結果為6 ng/mL,那么表示此樣本中確實有待測物質,但是濃度太低,不能精確測量。只能認為待測物質濃度<8 ng/mL,但不能確定具體濃度。
03:LoQ:Limit of quantitation
譯為:定量限,指能夠準確測量的很少濃度。比如LoQ是10 ng/mL,測試結果為12 ng/mL,表示樣本中的待測物質的濃度就是12 ng/mL。
簡單來說,LoB來定義0濃度樣本的標準,LoD判斷待測物質的有和無,LoQ才能準確測量具體有多少待測物質。一般來說三者的關系是LoB<LoD≤LoQ。 那么如何來建立LoB、LoD、LoQ? 具體的建立方法有很多種,在此介紹簡單的方法。 LoB:可以對多個空白樣本進行多天、多次測試。對所有測試進行統計分析,取95%的置信度。簡單來說,就是測值從小到大排序,第95%的濃度就是LoB。實際建立時,可以取95%附近的幾個測值的平均值定義LoB。 LoD:可以利用信噪比建立LoD。對多個已知的低濃度樣本進行重復測試,可以將和LoB的信噪比為3:1時的樣本濃度定為LoD。 LoQ:將多個已知濃度的樣本進行比例稀釋,多次重復檢測稀釋后的樣本。計算各個稀釋樣本測值的變異系數CV值,繪制樣本濃度和CV的擬合曲線。LoQ的定義是可以準確測量的很少濃度,所以可以通過變異系數CV來判斷是否準確。理論上濃度越低,CV越大。通過擬合曲線計算出可接受的最大變異系數對應的濃度值,可以確定為LoQ。
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